黑水虻是水虻科扁角水虻属动物，它原产于美 洲[1]。黑水虻具有繁殖快、食源广泛、易饲养、动物适 口性好等优点，可用于畜禽粪便的减量化、无害化处 理和资源化利用，有助于畜牧养殖业的绿色环保和可 持续性发展[2-3]。黑水虻幼虫营养丰富，蛋白质含量 较高，氨基酸组成均匀，富含多种脂肪酸，是一种优良 的蛋白质与油脂饲料资源。此外，因富含月桂酸、己 二酸和内源性抗菌肽等抗菌成分，具有潜在的促机体 生长发育和调节免疫的功能[4]。本研究以黑水虻饲 料饲喂肉鸡，应用 ELISA 试剂盒对补体蛋白 3(C3)、 免疫球蛋白 IgA、IgG、IgM、鸡白细胞介素 6(IL-6)和 鸡肿瘤坏死因子 α(TNF-α)等相关免疫因子表达情 况进行了检测，评估黑水虻对肉鸡免疫增强效果。

1 材料与方法

1.1 材 料

       鸡 补 体 蛋 白 3(C 3)、免 疫 球 蛋 白 I g A 、I g G 、I g M 、鸡白细胞介素 6(IL-6)、鸡肿瘤坏死因子 α(TNF-α)， ELISA 检测试剂盒由泉州市睿信生物科技有限公司 生产。试验鸡品种为铁脚麻鸡。饲养全期采用按 组分笼饲养，自然温度 l8~28 °C，自动投料，自由 饮水。

1.2 试验动物及分组

       采用随机分组试验方法将 300 只 28 日龄健康铁脚麻肉鸡，随机分成 5 组，每组 3 个重复，每个重 复 20 只进行饲养试验。分别用黑水虻幼虫粉替代 基础饲料中 0(对照)、5%、10%、15%、20% 的豆粕， 配制成 5 种试验饲料，并分别记为对照组、处理 1 组、处理 2 组、处理 3 组、处理 4 组饲养铁脚麻鸡，饲 喂 83 d 后，从 5 个试验组 300 只鸡中平均每组随机 抽取 20 只(共 100 只)进行屠宰试验，评估免疫器官 发育情况，同时采血检测相关免疫指标。

1.3 免疫器官增重测定

      在屠宰性能测定中，对胸腺、脾脏、法氏囊的发育情况进行测量，比较各处理组间差异。

1.4 免疫指标测定

      采集血清，用 ELISA 试剂盒检测鸡补体蛋白 3(C3)、免疫球蛋白 IgA、IgG、IgM、鸡白细胞介素 6 (IL-6)、鸡肿瘤坏死因子 α(TNF-α)等免疫相关指标，按试剂盒说明书操作。

1.5 数据统计分析

       按常规方法进行数据统计，用 IBM SPSS 22.0 版本进行方差分析和相关分析，并用最小显著差数法 进行多重比较，P<0.05 表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 免疫器官增重测定结果

      胸腺、脾脏增重均存在统计学差异(P<0.05)(表1)。胸腺对照组与处理 1 组和处理 4 组存在统计学 差异，脾脏对照组与处理 1 组、处理 2 组和处理 3 组 均存在统计学差异，其中对照组与处理 1 组和处理 2 组差异较大。

表 1 免疫器官增重测定结果

2.2 免疫指标测定结果

       补体 C3 表达对照组与处理 1 组、处理 4 组差异较大;IgA 对照组与处理 2 组和处理 4 组差异较大; IgG 对照组与处理 3 组、处理 4 组间有统计学差异; IgM 对照组与处理 1 组、处理 4 组这 2 组有统计学差 异(P<0.05);IL-6 对照组与处理 2 组、处理 3 组、处 理 4 组这 3 组差异较大;TNF-α 表达对照组与处理 组间无统计学差异(P>0.05)。表明黑水虻饲料对 鸡的免疫有一定的增强作用。C3、IgA、IgG、IgM、 IL-6 表达对照组与 4 个处理组间存在统计学差异( P < 0 . 0 5 )( 表 2 ) 。

表 2 免疫球蛋白及部分细胞因子表达检测结果

3讨论

       豆粕是最常见、最理想、使用量最多的主要蛋 白原料，需求量一直居高不下，因蛋白质资源匮乏，价格时常上涨，想要降低饲料成本，提高养殖的经 济效益，需要寻找能够替代豆粕的蛋白质饲料原 料[5]。而地球上种类和数量众多的昆虫，多含有丰 富的蛋白质，是可持续利用的饲用蛋白质来源[6]。 黑水虻幼虫是蛋白质含量极其丰富的昆虫，其蛋白 质含量高达 44%，与豆粕的蛋白质含量相当。另 外，氨基酸组成均匀，富含多种脂肪酸，其氨基酸组 成中以月桂酸含量最高，其次是棕榈酸，含有多种 微量元素，钙含量较高，还含多种维生素和类胡萝 卜素[7]。目前国内外学者正在研究黑水虻幼虫补充 饲料蛋白质资源的可行性。猪、鱼饲料中添加黑水 虻幼虫粉均可取得良好的饲养效果[8-9]。本研究结 果也显示黑水虻幼虫粉替换 15% 豆粕可有效促进 机体生长。
机体免疫系统由免疫器官、免疫组织、免疫细胞和免疫活性因子组成。胸腺、脾脏和法氏囊发育情况是评估禽类免疫功能的重要指标[10]。本研究结果显示黑水虻幼虫替代饲料饲喂的肉鸡免疫器官发育良好，生长增重快。其机理应与黑水虻幼虫富含的月桂酸、己二酸和内源性抗菌肽等抗菌成分有关，能促进机体对营养物质的消化和利用，改善肠道的微生物菌群，进而促进机体的生长发育和免疫 机能[11-12]。

      本研究结果显示饲喂黑水虻幼虫粉的鸡免疫 球蛋白、IL-6 和 TNF-α 表达随添加量的增加出现不 同程度上升或下调。可见黑水虻幼虫粉可调节机 体免疫功能，IL-6、TNF-α 等细胞因子参与了这一 过程。IL-6 是一种功能广泛的多效性细胞因子，可 调节多种细胞的生长和分化、具有调节免疫应答、 急性期反应及造血功能，并在机体的抗感染免疫反 应中起重要作用。而 TNF-α 主要由活化的单核-巨 噬细胞及其他多种细胞产生，可引起机体恶病质， 出现进行性消瘦等症状。

        综上所述，黑水虻幼虫可为动物饲料提供丰富 的蛋白质来源。黑水虻及其幼虫体内的月桂酸、己 二酸和抗菌肽具有广谱的抗菌性，其独特的杀菌机 制能够抗菌、抗病毒，且不易产生耐药性，随着抗生素在养殖业的应用受到越来越多的限制，黑水虻在 饲料添加剂中的应用前景正在变得更加广阔[13-14]。