P. C. Scott¹, T. B. Wilson¹, J. A.,Quinteros¹, A. M. Anwar¹, T. Scott¹, T. T. H. Van² And R. J. Moore²

　　¹ 斯科莱西亚有限公司，8/19 诺伍德新月，维多利亚州穆尼彭德 3039，澳大利亚；

　　² RMIT大学班杜拉校区，264普兰迪路，维多利亚州米尔公园 3082，澳大利亚；

　　摘要

　　家禽中，斑点肝病（SLD）是一种由肝弯曲杆菌（Campylobacter hepaticus）引起的严重的肝脏疾病，普遍影响蛋鸡饲养。本研究评估了博落回植物来源的异喹啉生物碱isoquinoline alkaloids (IQA)（异喹啉生物碱IQA，含有0.5%血根碱，德国仹犇泰Phytobiotics Gmbh）在改善斑点肝病影响方面的功效。攻毒处理组的蛋鸡用肝弯曲杆菌C. hepaticus口服攻毒后，与无IQA添加的蛋鸡饲料相比，IQA添加组肝脏表面的粟粒性病变数量减少并且检测到病变评分降低。虽然在阳性对照组感染后检测到蛋重量显着下降，但在同一时期，高剂量异喹啉类生物碱组HD-IQA中的蛋重量有所增加。高剂量异喹啉类生物碱HD-IQA组的产蛋量得到改善。生产指标的其他小变化包括饲料消耗量增加和处理过的蛋鸡体重增加。本研究表明，攻毒斑点肝病病菌条件下补充含有异喹啉生物碱的饲料添加剂可以有效降低蛋鸡的斑点肝病影响。

　　介绍

　　斑点肝病（SLD）的特征是死亡率增加，特别是在产蛋高峰期，肝脏中发生多个灰色/白色病变斑点以及蛋产量减少。它是由肝弯曲杆菌Campylobacter hepaticus引起的（Van，2016），而此细菌对治疗性抗生素易感，尽管已经报道产生耐药性（Grimes和Reece，2011）。在这项研究评估了采食异喹啉生物碱的饲料的蛋鸡在肝弯曲杆菌C. hepaticus攻毒后对斑点肝病的抑制能力。为此测量了在攻毒肝弯曲杆菌C. hepaticus之前和之后的鸡群生产指标。此外，对感染后7天和29天的蛋鸡进行随机抽样解剖检查，以评估肝损伤程度，检测肝弯曲杆菌C. hepaticus引起的疾病的指标。

　　材料与方法

　　动物福利认证：WSIAEC – 19.17。将132只21周龄的海蓝Hy-Line蛋鸡分布到：阴性对照组（NC 负对照，28只），未IQA添加且未攻毒;阳性对照组（PC 正对照，36只），未IQA添加和攻毒;低剂量异喹啉类生物碱（LD-IQA低浓度异喹啉类生物碱添加，100毫克产品/千克饲料或1.4 ppm的IQA，32只）和高剂量异喹啉类生物碱（HD-IQA高浓度异喹啉类生物碱添加，200毫克产品/千克饲料，相当于2.8 ppm的IQA，36只）。博落回植物来源的异喹啉生物碱IQA，含有0.5%血根碱，德国仹犇泰Phytobiotics Gmbh提供。蛋鸡没有肝弯曲杆菌C. hepaticus。每组细分为“短期”和“长期”，确定攻毒后解剖的时间;短期期组为6天，长期组为29天。短期组用于评估蛋鸡的肝脏病变，而长期组用于比较组间的生产参数（χ2和双侧Fisher的精确测试）。蛋鸡用植物生物补充剂喂养28天。在此期间之后，蛋鸡口服攻毒含有1×109 cfu的肝弯曲杆菌C. hepaticus菌株HV10T的培养基，如Van（2017）所述，或NC 负对照组口服无菌培养基作为应激对照。

　　结果与讨论

　　a)蛋重

　　鸡蛋重量如表1所示。NC 负对照组中的蛋重量随时间增加。PC 正对照组的蛋重量在攻毒后3日至6天之间显着下降（攻毒前后;P = 0.02）。鸡蛋重量恢复到14日 攻毒后（4.12%）。然而，与攻毒后3日和6日相比，蛋重量没有显着提高（P分别为0.86和0.07）。在LD-IQA低浓度异喹啉类生物碱添加组中，蛋重量在3日，6日和14日 攻毒后日间没有显着变化。HD-IQA高浓度异喹啉类生物碱添加组蛋体重在攻毒后3日至6日之间增加，与攻毒后3日（P = 0.01）和攻毒后6日（P = 0.03）相比，攻毒后14日蛋重显着增加。异喹啉类生物碱IQA添加为2.8 ppm的食料阻止了斑点肝病攻毒挑战鸡群的鸡蛋体重减轻。

表1- 每组平均蛋重量及其在不同采样日之间的变化百分比

 

　　b)产蛋性能

　　斑点肝病对产蛋量有显着影响（PC 正对照组与NC 负对照组，表2）。HD-IQA高浓度异喹啉类生物碱添加组的产量显着较高，但LD-IQA低浓度异喹啉类生物碱添加组的产量与PC 正对照组相比没有差异。高剂量的IQA能够在斑点肝病攻毒挑战后改善蛋产量。

表2–每组预期生产的鸡蛋数量使用攻毒前的鸡蛋生产数据计算得出

* 列间不同字母表示显着差异（P < 0.05），由χ2和双侧费舍尔精确检验计算得出。

　　c)解剖发现

　　在解剖期间，估计肝脏病变的数量和病变评分。结果总结在图 1 中。NC 负对照组无病变。PC 正对照组和LD-IQA低浓度异喹啉类生物碱添加组±SD的平均病变数量为201.1±327.6和分别为183.6±318.4，与NC 负对照组相比明显更高。HD-IQA高浓度异喹啉类生物碱添加组平均病变数为41.7±67.3，未显着高于NC 负对照（P = 0.22），但未显着低于PC 正对照组的平均数。同样，对于病变评分，HD-IQA高浓度异喹啉类生物碱添加组蛋鸡的肝病评分中位并不显着高于NC 负对照组，尽管与PC 正对照组相比没有显着降低。与NC 负对照相比，PC 正对照组和LD-IQA低浓度异喹啉类生物碱添加组的中位得分在统计学上更高。然而，将阴性对照纳入比较具有误导性，因为该组中肝脏病变的数量为零。当从计算中排除NC 负对照和LD-IQA低浓度异喹啉类生物碱添加组，并且仅比较HD-IQA高浓度异喹啉类生物碱添加和PC 正对照组时，病变数量之间的差异具有统计学意义（P = 0.04），但斑点肝病肝脏评分无显着差异（P = 0.11，图1）。

　　这些结果表明，植物生物减轻斑点肝病诱导的肝脏病理变化。以前的现场报告描述了在多种自由散养蛋鸡中使用两种植物生物（牛至和异喹啉生物碱）可以促使鸡群发病率，发病年龄和斑点肝病临床体征严重程度的下降趋势（Scott，2020）。含有异喹啉生物碱提取物的食料在减轻肠道细菌负面影响方面的积极作用已经被描述过（Xue，2017）。

　　图1. 对肝脏的分析摘要，从肖特组的母鸡的死后分析中得出安乐死攻毒后7日（仅限PC和HD-IQA组）。A，列，具有SD（误差线）的病变平均数量。B，每个矩形上的中心线，中位数分数;框的边距，四分位距;外线，最小值和最大值。*， P < 0.05;ns，不显着

　　d)采食量

　　所有蛋鸡在攻毒后的第一周内平均饲料消耗量都有适度增加（图2A）。然而，与其他三组相比，NC 负对照的提高更为突出。在所有长期组中，攻毒后的平均饲料消耗量都有所增加。HD-IQA高浓度异喹啉类生物碱添加是唯一一个在29 攻毒后下进料消耗量增加显着更高的组（图2B）。这可能表明含有植物生物的食料的适口性增加。

　　图2. 按组和采样周期划分的平均饲料消耗量。每列代表每组的平均饲料消耗量，黑线代表SD。DAE，攻毒后几天。Ns，不重要。**，P < 0.01。

　　e)增重

　　在研究开始时，蛋鸡群被物理阻挡，因此IQA添加组之间没有差异。与NC 负对照组和PC 正对照组相比，用较高剂量的IQA饲养的蛋鸡在攻毒前和攻毒后29天之间表现出饲料消耗量显着增加（NC 负对照组和PC 正对照组未见），并且最终体重显着升高（图3）。可以得出结论，异喹啉生物碱IQA增加了蛋鸡的食欲。之前的一项研究将植物生物获得的一些有益效果与增加采食量，改善营养消化，消化酶增加和肠道营养物质吸收更大有关（Abudabos，2018）。

图3 . 研究开始和结束时长组蛋鸡的体重。*，P < 0.05

　　在本研究中观察到对IQA浓度的一些剂量正相关，与LD-IQA低浓度异喹啉类生物碱添加组相比，HD-IQA高浓度异喹啉类生物碱添加组的蛋重量在激发后立即病变评分和病变数量有所改善，这表明当将这种植物生物纳入商业饲料时，添加量对于获得本研究中看到的益处至关重要。

　　结论

　　以200毫克/千克饲料或2.8 ppm（1 ppm的血根碱和1.8 ppm的其他生物碱）的剂量条件下含有异喹啉类生物碱IQA的饲料能够减少斑点肝病对蛋鸡的疾病影响，包括更高的鸡蛋重量和产蛋量，肝脏病变数量的减少，以及蛋鸡体重和饲料消耗的改善。应开展进一步的现场和实验室攻毒研究，以更好地确定该饲料添加剂在改善斑点肝病方面的益处和作用功效。

　　参考文献

　　Abudabos AM, Alyemni AH, Dafalla YM & Khan RU (2018) Journal of Applied Animal Research46: 691-695.

　　Grimes T & Reece R (2011) Proceedings of the 16th Western Poultry Disease Conference, Sacramento, CA, 53-56.

　　Scott PC, Wilson T, Quinteros JA, Anwar AM, Scott T, Van TTH & Moore R (2020) Assessment of the efficacy of autogenous vaccines in Spotty Liver Disease control, 1BSO3SX. Retrieved from: Not available yet.

　　Van TTH, Elshagmani E, Gor M-C, Anwar A, Scott PC & Moore RJ (2017) Veterinary Microbiology 199: 85-90.

　　Van TTH, Elshagmani E, Gor MC, Scott PC & Moore RJ (2016) International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology 66: 4518-4524.

　　Xue G, Wu S, Choct M, Pastor A, Steiner T & Swick RA (2017) Poultry Science 96: 3581- 3585.